RNA編輯廣泛存在于植物的線粒體和葉綠體中。RNA編輯作為一種RNA轉(zhuǎn)錄后加工機(jī)制,對于調(diào)控基因表達(dá)具有重要意義。RNA C-U的編輯是胞嘧啶(C)經(jīng)過脫氨轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ║)的過程。在此過程中,PPR (pentatricopeptide repeat)結(jié)構(gòu)域通常負(fù)責(zé)識別編輯位點(diǎn),而DYW結(jié)構(gòu)域則負(fù)責(zé)提供脫氨酶活性完成C-U的編輯。然而,E類和E+類PPR蛋白因缺失DYW結(jié)構(gòu)域無法單獨(dú)完成脫氨過程,需要分別通過招募脫氨酶PCW1(PPR motif, coiled-coil, and DYW domain-containing protein 1)和DYW2進(jìn)行RNA編輯。目前,盡管在玉米中已有多個(gè)PPR蛋白被報(bào)道參與RNA的編輯過程,但仍有許多RNA編輯因子有待于進(jìn)一步挖掘。
近日,中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所陳化榜研究組撰寫的題為DEFECTIVE KERNEL 56 functions in mitochondrial RNA editing and maize seed development的研究論文,在線發(fā)表在《植生生理》(Plant Physiology,DOI:10.1093/plphys/kiad598)上。
本研究鑒定了一個(gè)影響玉米籽粒發(fā)育的DEK56基因。DEK56編碼一個(gè)線粒體定位的E類PPR蛋白。該蛋白突變后造成玉米籽粒胚胎發(fā)生和胚乳發(fā)育停滯,籽粒種皮顏色發(fā)白、皺縮。研究通過STS-PCRseq(strand- and transcript-specific RNA sequencing)分析發(fā)現(xiàn),突變體dek56中21個(gè)線粒體基因的48個(gè)編輯位點(diǎn)C-U的編輯效率發(fā)生了明顯改變。其中,matR(maturase-related)-1124位點(diǎn)C-U的編輯幾乎完全喪失。進(jìn)一步,研究發(fā)現(xiàn),DEK56能夠在ZmMORFs(Multiple Organellar RNA Editing Factors)和ZmGRP23 (GLUTAMINE-RICHPROTEIN23)的輔助下招募PCW1來完成RNA C-U的編輯。此外,RT-PCR和RT-qPCR結(jié)果表明,線粒體氧化磷酸化基因nad4(NADH dehydrogenase subunit 4)的內(nèi)含子1和3的剪接效率在dek56中顯著降低。這種剪接缺陷直接導(dǎo)致nad4的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平下降,造成線粒體復(fù)合物I組裝異常、活性降低,從而引起能量供應(yīng)不足,最終導(dǎo)致玉米籽粒敗育。基于上述成果,該研究揭示了PPR蛋白DEK56在線粒體RNA編輯和玉米籽粒發(fā)育方面的重要作用。
研究工作得到國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃的支持。