近日,北京市農(nóng)林科學(xué)院院畜牧所在食品科學(xué)知名期刊food chemistry(if:7.514 / q1 top)發(fā)表題為“monoclonal antibody-based indirect competitive elisa for quantitative detection of enterobacteriaceae siderophore enterobactin”的文章(https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2022.133241)。該研究建立了可以準(zhǔn)確定量檢測(cè)腸桿菌科細(xì)菌分泌的小分子化合物腸菌素(enterobactin,ent)的間接競(jìng)爭(zhēng)elisa(indirect competitive elisa,ic-elisa)方法,為監(jiān)測(cè)腸桿菌科細(xì)菌定植水平以及腸道健康狀況奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
食源性致病菌是食品安全的主要敵人,無(wú)論是發(fā)達(dá)國(guó)家還是發(fā)展中國(guó)家,食源性致病菌引發(fā)的疾病時(shí)刻威脅著人群的健康和生命安全。據(jù)世界衛(wèi)生組織(who)統(tǒng)計(jì),全球每年發(fā)生食源性疾病可達(dá)數(shù)十億人。因此從源頭實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)病原菌數(shù)量,可以更早地發(fā)現(xiàn)、預(yù)防和控制食品安全隱患,對(duì)保障食品安全具有重要意義。
腸道微生物菌群的穩(wěn)態(tài)對(duì)于維持宿主健康、抵抗病原菌定植至關(guān)重要。在腸道炎癥期間,腸道微生物菌群發(fā)生顯著變化。團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn),ent在食源性致病菌定植家禽腸道過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用(yifang cui, et al. vaccines, 2020. https://doi.org/10.3390/vaccines8040747)?;诖耍狙芯吭谘兄芿nt單克隆抗體基礎(chǔ)上,建立了快速定量檢測(cè)ent的ic-elisa方法,研究結(jié)果為通過(guò)檢測(cè)ent含量作為指示腸桿菌科細(xì)菌定植水平以及腸道健康狀況的標(biāo)示物奠定了基礎(chǔ)。
在該研究中,通過(guò)將小分子化合物ent與載體蛋白偶聯(lián),于國(guó)內(nèi)外首次制備了ent單克隆抗體。對(duì)建立的ic-elisa方法中不同參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化,確定了最佳競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)條件;對(duì)檢測(cè)限、回收率、變異系數(shù)等測(cè)定,驗(yàn)證了該檢測(cè)方法具有良好的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。將建立的ic-elisa方法應(yīng)用于細(xì)菌ent產(chǎn)量的定量分析,可有效定量不同種屬細(xì)菌ent產(chǎn)量,并監(jiān)測(cè)ent產(chǎn)量隨細(xì)菌生長(zhǎng)的動(dòng)態(tài)變化,具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、特異等顯著優(yōu)勢(shì)。
下一步研究團(tuán)隊(duì)將圍繞食源性病原細(xì)菌與宿主的相互作用,探究病原細(xì)菌在定植和致病過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的致病因子,揭示病原細(xì)菌在宿主腸道內(nèi)定植和致病的分子機(jī)制,發(fā)掘病原細(xì)菌新的防控靶標(biāo),這對(duì)食源性病原細(xì)菌的防控以及保障動(dòng)物源性食品安全將具有重要價(jià)值。
我院畜牧所崔一芳助理研究員為本文第一作者,我院徐福洲研究員和美國(guó)田納西大學(xué)林軍教授為本文共同通訊作者,論文第一通訊單位為北京市農(nóng)林科學(xué)院。該研究得到了北京市農(nóng)林科學(xué)院創(chuàng)新能力建設(shè)專項(xiàng)(kjcx20220422)和院青年科學(xué)基金(qnjj202109)的資助。