菜豆是食用豆類之一,具有品種繁多、表型特征差異大、基因組小以及繁殖周期短等特點(diǎn),是研究豆科植物基因功能的重要資源。黃金勾是我國(guó)北方的菜豆品種,突出特點(diǎn)是肉厚、纖維少、營(yíng)養(yǎng)豐富。中國(guó)科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所通過輻射誘變構(gòu)建黃金勾突變體庫(kù),在3500株M3代單株株行中,生育期(開花期與成熟期)、葉部性狀、株型、育性及豆莢或種皮顏色等性狀均表現(xiàn)出變異。
野生型黃金勾的豆莢隨著生長(zhǎng)快速褪綠變黃,而在突變體庫(kù)中,出現(xiàn)較高比例的綠色豆莢突變體,且一直保持綠色。為研究黃金勾豆莢褪綠及類黃酮營(yíng)養(yǎng)成分的變化,對(duì)3個(gè)發(fā)育階段的豆莢進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組和代謝組測(cè)序。隨著豆莢的發(fā)育,葉綠素含量降低,在野生型黃金勾中下降速率更快。對(duì)葉綠素代謝通路分析發(fā)現(xiàn),葉綠素降解基因紅色葉綠素降解產(chǎn)物還原酶(RCCR)在黃金勾綠色小豆莢中高表達(dá),而在綠色豆莢突變體中表達(dá)量較低,推測(cè)該基因是黃金勾豆莢褪綠的關(guān)鍵基因。同時(shí),綠色豆莢突變體豆莢質(zhì)地較硬,烹飪口感差,通過測(cè)定纖維素含量,發(fā)現(xiàn)綠色豆莢突變體中纖維素含量顯著高于野生型,且與野生型相比,綠色豆莢突變體中葉纖維素合成基因表達(dá)量上調(diào)。通過豆莢代謝組研究,共檢測(cè)到154種類黃酮物質(zhì),隨著豆莢發(fā)育,多數(shù)類黃酮物質(zhì)含量降低。在黃金勾中,柚皮苷、牡荊素-2-O-鼠李糖苷、異槲皮甙、槲皮素、山奈酚、紫云英苷和芒柄花苷含量較高;在綠色豆莢突變體中,木犀草素、芹菜素、李屬異黃酮、鷹嘴豆素、黃顏木素含量較高。該研究從生理和分子水平揭示黃金勾豆莢褪綠的機(jī)制,并對(duì)豆莢發(fā)育過程中類黃酮物質(zhì)進(jìn)行代謝分析,為解析營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)變化提供理論基礎(chǔ)。
研究工作得到國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目、中科院重點(diǎn)部署項(xiàng)目及國(guó)家自然科學(xué)基金等的資助。
野生型與綠莢突變體豆莢顏色變化模式圖