近日，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院在國際食品領(lǐng)域知名期刊Journal of Dairy Science（中科院一區(qū)，IF=4.225）在線發(fā)表了題為“Effective and repeatable chromatographic separation of 5 nucleotides in infant formula milk powder by ion-pair high-performance liquid chromatography - ultraviolet”的文章。文章通訊作者為韋曉群副研究員，第一作者為2019級(jí)碩士生陳元佳。

 

　　嬰幼兒配方奶粉中添加適量的核苷酸對(duì)嬰兒的生長發(fā)育有重要作用，然而過量添加會(huì)增加疾病風(fēng)險(xiǎn)，因此各國對(duì)嬰幼兒配方奶粉產(chǎn)品中的核苷酸含量進(jìn)行限制，并需要相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)支持。奶粉中含有的乳糖，與核苷酸結(jié)構(gòu)相似，對(duì)檢測(cè)造成干擾，通常需要復(fù)雜的預(yù)處理方法或成本較高的同位素內(nèi)標(biāo)法。針對(duì)上述問題，我們選用C18色譜柱，加入離子對(duì)試劑與核苷酸中的磷酸結(jié)合以延長其在色譜柱中的保留時(shí)間達(dá)到分離目的，同時(shí)采用HPLC-UV檢測(cè)器避免試劑產(chǎn)生的污染。為提高方法定量的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，通過研究柱溫、流動(dòng)相pH值、離子對(duì)試劑濃度與五種核苷酸（CMP，胞嘧啶核苷酸；UMP，尿嘧啶核苷酸；AMP，腺嘌呤核苷酸；GMP，鳥嘌呤核苷酸；IMP，次黃嘌呤核苷酸）保留時(shí)間的關(guān)系，建立了以親水C18二異丙基為色譜柱的HPLC-UV方法。選擇了最佳的分離條件，并對(duì)其機(jī)理進(jìn)行了解釋。提出了核苷酸的互變結(jié)構(gòu)模型，以顯示條件對(duì)其極性的不同影響。這一結(jié)果表明，沒有嚴(yán)格的條件，就無法實(shí)現(xiàn)核苷酸的高效分離。該方法可檢測(cè)單核苷酸的線性范圍為10~1，000 mg/kg，滿足常規(guī)核苷酸添加的要求。方法的標(biāo)準(zhǔn)添加回收率為80.0~110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為0.5~3.5%（n=6）。通過將這種方法應(yīng)用于中國市場(chǎng)上的一系列嬰幼兒配方奶粉產(chǎn)品檢測(cè)，我們發(fā)現(xiàn)其中少數(shù)產(chǎn)品超過了核苷酸的法定限度。

 

　　該研究得到廣東省重點(diǎn)地區(qū)科技規(guī)劃項(xiàng)目（編號(hào)：2019B020211001）、中國廣州市科技規(guī)劃項(xiàng)目（no.201803020044）、國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（編號(hào)：2017YFC1601705）和廣東省農(nóng)業(yè)廳（編號(hào)：2019KJ130）資助。

 

　　原文鏈接：https://doi.org/10.3168/jds.2021-21133

 

 

　　韋曉群，男，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)副研究員，碩士生導(dǎo)師，中山大學(xué)高分子化學(xué)與物理博士，中國人民大學(xué)農(nóng)林經(jīng)濟(jì)管理博士后，原廣東檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心（現(xiàn)廣州海關(guān)技術(shù)中心）高級(jí)工程師。研究方向包括食品質(zhì)量安全檢測(cè)技術(shù)、食品加工制造、功能性食品開發(fā)等。曾獲廣東省科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)二等2項(xiàng)，國家質(zhì)檢總局科技興檢獎(jiǎng)二等1項(xiàng)、三等2項(xiàng)；主持或者參與制修訂標(biāo)準(zhǔn)4個(gè)；參與出版專著9部。近三年（2020年至今）授權(quán)國家發(fā)明專利6項(xiàng)，發(fā)表中科院一區(qū)TOP科研論文7篇。