近日,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所豬基因組設(shè)計育種創(chuàng)新團隊,首次創(chuàng)建了“ 一管式”快速檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒的熒光檢測技術(shù),可以在25分鐘內(nèi)精準檢測出該病毒。相關(guān)研究論文被選為封面文章,刊登在《ACS合成生物學(xué)(ACS Synthetic Biology)》上。
豬繁殖與呼吸綜合征是豬群發(fā)生的一種急性、高度傳染的以繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)癥狀為特征的病毒性傳染病,主要由豬繁殖與呼吸綜合征病毒導(dǎo)致。因此,早期發(fā)現(xiàn)和快速精準檢測出該病毒是有效防控疫病的關(guān)鍵。目前的病毒檢測技術(shù)如環(huán)介導(dǎo)等溫擴增、定量逆轉(zhuǎn)錄PCR和數(shù)字PCR等存在假陽性高、程序復(fù)雜、檢測耗時長、操作要求高且設(shè)備昂貴等不足。因此,開發(fā)一種快速簡便、準確靈敏且低成本的檢測技術(shù)非常必要。
該研究將CRISPR-Cas12a系統(tǒng)、逆轉(zhuǎn)錄重組酶聚合酶擴增組分和單鏈DNA熒光報告器合為一管,在37攝氏度孵育25分鐘后,便可通過便攜式發(fā)光儀(藍光儀或紫外發(fā)光儀)實現(xiàn)可視化快速檢測。相比傳統(tǒng)的檢測方法,該技術(shù)的靈敏度可達到1拷貝/微升,且僅需25分鐘就可得到結(jié)果。
高靈敏性熒光檢測技術(shù)具有簡便、精準、快速、低成本等優(yōu)點,可用于豬繁殖與呼吸綜合征病毒等各種相關(guān)病毒的快速檢測。該團隊還建立了非洲豬瘟等其它疫病病毒的檢測技術(shù),已申請4項國家發(fā)明專利,將為豬的疫病防控和抗病育種提供有力的技術(shù)保障。
該研究得到中國農(nóng)科院科技創(chuàng)新工程、深圳市技術(shù)攻關(guān)等項目的資助。
原文鏈接:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acssynbio.1c00103