近日,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)科研團(tuán)隊(duì)通過基因編輯技術(shù)獲得了對兩種真菌病害具有高抗性的作物。相關(guān)研究以“Editing homologous copies of an essential gene affords crop resistance against two cosmopolitan necrotrophic pathogens(一石二鳥:編輯一個(gè)植物基因,防控兩種真菌病害)”為題,在線發(fā)表在Plant Biotechnology Journal。
在農(nóng)田環(huán)境中,作物往往同時(shí)應(yīng)對多種病原菌的侵染,創(chuàng)制能夠抵御多種病原物的品種將顯著提高作物的生產(chǎn)效益和生態(tài)效益。該研究利用CRISPR/Cas9技術(shù)對油菜中核盤菌效應(yīng)蛋白的靶標(biāo)基因BnQCR8進(jìn)行編輯,獲得了對菌核病和灰霉病抗性均顯著增強(qiáng)的油菜植株。核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是典型的死體營養(yǎng)型病原真菌,可分別侵染700和3000多種植物,包括十字花科、茄科、菊科和豆科等科的重要經(jīng)濟(jì)作物,引起菌核病和灰霉病,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。但生產(chǎn)上缺乏高抗菌核病和灰霉病的品種,也沒有同時(shí)抗兩種病害的品種可供利用。
QCR8是呼吸鏈上細(xì)胞色素b-c1復(fù)合物的一個(gè)保守亞基,研究發(fā)現(xiàn)QCR8是核盤菌效應(yīng)蛋白SsSSVP1及其灰葡萄孢同源蛋白BcSSVP1在植物中的靶標(biāo)蛋白。在油菜中存在8個(gè)同源拷貝的QCR8,利用CRISPR/Cas9技術(shù)將油菜中8個(gè)同源拷貝進(jìn)行編輯,分別獲得不同基因型的BnQCR8突變體。核盤菌和灰葡萄孢在BnQCR8突變體(WCR1、WCR2、WCR3、WCR4和WCR5)上形成的病斑面積均顯著小于野生型Westar上的病斑面積。此外,被編輯的BnQCR8基因拷貝數(shù)越多,突變體的抗病能力越強(qiáng),即突變體株系對核盤菌的抗性與突變體中BnQCR8基因被編輯的數(shù)量呈正相關(guān),表明編輯BnQCR8基因顯著提高了油菜對菌核病(圖1 a,c)和灰霉病(圖1 b,d)的抗性。編輯BnQCR8基因后,對油菜的角果、種子數(shù)量、單株產(chǎn)量、千粒重及種子含油量等沒有顯著性差異影響(圖c),表明編輯BnQCR8基因在抗病分子育種中具有重要的實(shí)踐應(yīng)用價(jià)值。
圖 T2代BnQCR8突變體對菌核病和灰霉病的抗性(a和b)及成株期表型(c)
該研究從病原菌致病基因?yàn)槌霭l(fā)點(diǎn),篩選作物中靶標(biāo)基因,通過基因編輯培育抗病新品種,為提高植物廣譜抗病能力提供了新的研究思路。由于QCR8基因廣泛存在植物之中,編輯其它作物的該基因也極有可能獲得抗病材料,該研究為創(chuàng)制高抗菌核病和灰霉病的作物品種提供了重要的基因資源。
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、湖北省作物病害監(jiān)測和安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院博士研究生張學(xué)坤為論文第一作者,姜道宏教授為論文通訊作者。本研究得到了財(cái)政部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系的資助。
論文鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/pbi.13667