近日,糧食作物害蟲監(jiān)測與控制創(chuàng)新團(tuán)隊在植物學(xué)知名期刊《Plant Biotechnology Journal》在線發(fā)表題為“SmCSP4 from aphid saliva stimulates salicylic acid-mediated defense responses in wheat by interacting with transcription factor TaWKRY76”的研究論文。該研究發(fā)現(xiàn)了麥長管唾液蛋白SmCSP4作為激發(fā)子與小麥轉(zhuǎn)錄因子TaWRKY76互作進(jìn)而激發(fā)水楊酸(salicylic acid, SA)介導(dǎo)的防御反應(yīng)信號通路。
麥蚜是小麥上最重要的害蟲,列入農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的十大一類農(nóng)業(yè)害蟲之一。我國麥蚜(主要是麥長管蚜 Sitobion avenae ,在我國又稱為荻草谷網(wǎng)蚜 Sitobion miscanthi )常年為害面積達(dá)2億畝次以上,造成小麥減產(chǎn)20-30%,在大發(fā)生年份可造成60%的產(chǎn)量損失。麥蚜防治主要依賴化學(xué)殺蟲劑,但農(nóng)藥不合理且長期使用造成蚜蟲抗藥性增加、農(nóng)藥殘留及環(huán)境污染等問題。培育和利用抗蚜小麥品種是最為經(jīng)濟(jì)有效和綠色的麥蚜防控措施。研究麥蚜-小麥互作關(guān)系,明確小麥抗蚜分子機(jī)制,可為小麥抗蚜品種培育提供理論基礎(chǔ)。
本團(tuán)隊前期研究發(fā)現(xiàn)麥長管蚜唾液可誘導(dǎo)小麥防御反應(yīng),通過唾液腺轉(zhuǎn)錄組測序發(fā)現(xiàn)4個化學(xué)感受蛋白基因,但其功能和作用機(jī)制未知。本研究發(fā)現(xiàn)其中一個化學(xué)感受蛋白SmCSP4在麥長管蚜唾液腺中高表達(dá),Western blot結(jié)果證實SmCSP4在麥蚜取食過程中可被分泌到所取食的小麥葉片組織中。亞細(xì)胞定位結(jié)果發(fā)現(xiàn)SmCSP4定位在植物細(xì)胞核內(nèi)。為進(jìn)一步分析SmCSP4調(diào)控小麥防御功能,利用細(xì)菌III型分泌系統(tǒng)將SmCSP4導(dǎo)入小麥葉片內(nèi)實現(xiàn)瞬時過表達(dá),經(jīng)組織染色及生化檢測發(fā)現(xiàn)SmCSP4可引起小麥胼胝質(zhì)和過氧化氫大量積累。經(jīng)基因表達(dá)及激素水平變化以及室內(nèi)生測等研究結(jié)果表明,SmCSP4在小麥葉片瞬時表達(dá)后主要激發(fā)SA介導(dǎo)的小麥防御反應(yīng)通路,并導(dǎo)致麥蚜在小麥韌皮部取食歷期縮短、蚜蟲存活率與繁殖率顯著下降。利用納米材料介導(dǎo)的RNAi技術(shù)敲降SmCSP4后,麥蚜激發(fā)SA防御通路的能力下降,進(jìn)一步證實了SmCSP4在觸發(fā)小麥SA防御反應(yīng)中的重要作用。采用酵母雙雜交篩選小麥中互作蛋白,結(jié)果表明SmCSP4可與小麥轉(zhuǎn)錄因子TaWRKY76互作,并利用雙分子熒光互補(bǔ)(BiFC)和免疫共沉淀(Co-IP)驗證了兩者互作關(guān)系。通過病毒誘導(dǎo)基因沉默(VIGS)抑制TaWRKY76基因表達(dá)后可導(dǎo)致SA含量升高及其降解酶DMR6基因表達(dá)量顯著下降。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),TaWRKY76可與DMR6啟動子結(jié)合激活其基因表達(dá),但唾液蛋白SmCSP4和TaWRKY76的互作抑制其轉(zhuǎn)錄激活活性,導(dǎo)致DMR6基因表達(dá)下降,SA含量增加,進(jìn)而誘導(dǎo)下游防御信號途徑并提高小麥抗蚜性。研究結(jié)果進(jìn)一步豐富了蚜蟲-植物互作分子機(jī)制,并為小麥抗蚜育種提供新思路。
中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所張勇副研究員為論文第一作者,陳巨蓮研究員為通訊作者。比利時列日大學(xué)Frédércis Francis教授和中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所范佳副研究員等共同參與了工作。該研究得到國家重點研發(fā)計劃項目、國家自然科學(xué)基金項目等資助。
原文鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/pbi.14139