《乳及乳制品中牛羊源性成分定性檢測方法 實時熒光PCR法》和《乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性檢測 毛細管凝膠電泳法》團體標準問答

 

　　《食品安全法》中明確規(guī)定，禁止生產(chǎn)經(jīng)營“摻雜摻假”食品，由于山羊乳、綿羊乳、牦牛乳、水牛乳等特色乳的數(shù)量和日產(chǎn)量比較小，價格偏高，在經(jīng)濟利益的驅動下，有些不法商販和企業(yè)在特色乳中摻入牛乳以降低成本，牟取暴利，且各種乳成分接近，性質相似，在特色乳中摻入一定量的牛乳很難從感官及常規(guī)指標上檢測出來。這不僅僅涉及經(jīng)濟、營養(yǎng)價值和食品安全等問題，更直接影響著消費者的權益，而且容易引起過敏等健康風險，同時也擾亂了市場的秩序，制約了羊乳等特色乳產(chǎn)業(yè)的的正常發(fā)展。

 

　　另外，為加強對嬰幼兒配方乳粉等特殊食品的監(jiān)管力度，2016年6月，國家食品藥品監(jiān)督管理總局頒布了《嬰幼兒配方乳粉產(chǎn)品配方注冊管理辦法》，規(guī)定“產(chǎn)品名稱中有動物性來源的，應當根據(jù)產(chǎn)品配方在配料表中如實標明使用的生乳、乳粉、乳清（蛋白）粉等乳制品原料的動物性來源。使用的乳制品原料有兩種以上動物性來源時，應當標明各種動物性來源原料所占比例”。

 

　　為保障羊乳等特色乳及其產(chǎn)品品質，確保生產(chǎn)廠家及消費者的利益，亟待建立簡便、快速、準確的檢測乳及乳制品中乳源的技術體系，特制定這兩個標準，并于2020年由中國營養(yǎng)保健食品協(xié)會立項。

 

 

　　本標準是專門針對乳及乳制品建立的，規(guī)定了從樣品前處理、DNA提取方法、乳源物種檢測以及結果判定等方面的標準操作流程，適用于乳及其制品中牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和綿羊），以及家牛、牦牛、水牛、山羊、綿羊源性成分的定性檢測，適用的產(chǎn)品類別包括液態(tài)乳（巴氏殺菌乳、高溫殺菌乳、調制乳、滅菌乳、發(fā)酵乳），乳粉（全脂乳粉、脫脂乳粉、部分脫脂乳粉、調制乳粉、乳清粉），嬰幼兒配方乳粉等。

 

　　目前現(xiàn)有的標準僅規(guī)定了牛羊源性成分檢測方法，涉及樣品前處理、DNA提取方法不適應于乳及乳制品，且本標準的物種涉及牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和綿羊），以及家牛、牦牛、水牛、山羊、綿羊7種乳源物種成分實時熒光PCR法，適用范圍和應用領域更廣。

 

　　同時考慮到嬰幼兒配方乳粉中乳配料可能引入牛源的問題，因此本標準在建立牛（家牛、牦牛和水牛）以及家牛檢測方法時，既要考慮方法的特異性、靈敏度，同時還需兼顧不能檢出由于乳配料可能引入牛源成分的問題，因此在標準中規(guī)定了待檢樣品DNA濃度、上樣量、判定閾值等，為避免誤判奠定了基礎。

 

 

　　針對羊乳及乳制品檢測時，首先采用《乳及乳制品中牛（家牛、牦牛和水牛）和羊（山羊和綿羊）源性成分定性檢測方法實時熒光PCR法》作為初篩方法，采用本標準建立的牛（牛、水牛和牦牛）或家牛乳源成分對樣品中牛源性成分進行檢測。若未檢出牛基因成分，則判定羊乳制品中不含有牛乳成分；如檢出?；虺煞?，則進一步采用標準《乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性檢測毛細管凝膠電泳法》確證產(chǎn)品的蛋白成分來源，判定?；驒z測陽性的樣品是否含有來源于牛乳酪蛋白，進而對樣品的真實性進行判定，兩種方法聯(lián)合檢測解決了以往乳制品檢測中因配料復雜、乳源判別困難的瓶頸問題，技術路線圖如下圖1所示：

 

 

　　本標準規(guī)定了乳及其制品中牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和綿羊）源成分，以及家牛、牦牛、水牛、山羊、綿羊單一乳源成分的實時熒光PCR定性檢測方法，在實際檢測的過程中，可根據(jù)樣品標簽的乳源標識選擇相應的引物探針，可參考下表列舉的可能性產(chǎn)品例子，包括但不限于此表：

 

　　表1乳及乳制品中乳源及摻雜成分檢測舉例