臺灣地區(qū)修訂動物用藥品檢驗標準

    為因應豬環(huán)狀病毒感染癥不活化疫苗檢驗方法的發(fā)展，于效力試驗增列抗體力價試驗方式，2015年6月26日，臺灣地區(qū)“行政院農(nóng)業(yè)委員會”發(fā)布農(nóng)防字第1041472784號令，修正“動物用藥品檢驗標準”第一百八十二條之六。如下：

    第一百八十二條之六　　被檢豬環(huán)狀病毒感染癥不活化疫苗須符合下列條件：

    一、特性試驗：須具固有理學性狀，且無異物及異常氣味。

    二、無菌試驗：不得含有任何可能檢出之活菌。

    三、防腐劑含有量試驗：甲醛（Formaldehyde）含有量須為0.2%以下，硫柳汞（Thimerosal）須為0.01%以下。

    四、安全試驗：

    （一） 小鼠：選用十三公克至十五公克健康小鼠五只，皮下注射十分之一劑量，接種后觀察十四天，不得有任何不良反應而健存。

    （二） 天竺鼠：選用二百五十公克至三百公克健康天竺鼠三只，皮下注射一劑量，接種后觀察十四天，不得有任何不良反應而健存。

    （三） 豬：選用三周齡至四周齡無特定病原（Specific pathogen free；SPF）小豬三頭，取二頭以肌肉注射本疫苗二劑量，另一頭為對照組，接種后觀察二十一天，均須無任何不良反應而健存。

    五、效力試驗：依下列方法擇一試驗：

    （一） 抗原相對效價試驗：試驗方法依原廠提供ELISA抗原和程序制備測試盤，并依原廠提供之試劑、抗體、陰性對照品、陽性對照品與標準抗原進行測試，測試后之吸光值以Relpot 4.0軟件（U.S. Department of Agriculture, Center for Veterinary Biologics Program's Relative Potency Calculation Software, May 22, 2002）或最新版本軟件，計算RP值，RP值必須≧1。

    （二） 血清相對效價試驗：選用三周齡至四周齡SPF雞只七只進行試驗，免疫前先對雞只采血確定試驗雞只不具PCV2抗體。五只雞為免疫組，每只于腿部肌肉注射0.0125劑量。二只雞為控制組，四周后采血，依原廠提供的ELISA檢測套組以及方法進行PCV2血清學檢測，并以原廠所提供的ELISA檢測試劑軟件計算抗體力價，抗PCV2 ORF2抗原之ELISA平均抗體力價需大于24.5。

    （三） 抗原含有量試驗：試驗方法依原廠提供ELISA試劑和程序制備測試盤，依原廠提供之試劑與對照品進行測試，并以原廠所提供的ELISA檢測試劑軟件計算疫苗抗原量，每劑量需大于102.1 ELISA單位。

    （四） 抗體力價試驗：選用五周齡不具PCV2抗體小鼠十二只進行試驗，隨機取六只為免疫組，每只于腹腔注射0.5毫升，另六只為對照組。于免疫前及免疫后三周采血并分離血清，依原廠提供之檢測套組進行間接熒光抗體染色法（IFA）測定PCV2抗體力價。免疫后三周免疫組平均血清抗體力價需達八百倍以上，對照組血清抗體力價均需為陰性，且不得超過五十倍。

    前項試驗確定困難時，應予復檢。