近日“瘦肉精”事件的發(fā)生使人們再次將注意力集中到動物體內(nèi)的β-受體激動劑的檢測。 我們平常說的“瘦肉精”是一類動物用藥，有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精，例如萊克多巴胺（Ractopamine）及克倫特羅（Clenbuterol）等。沃特世作為色譜分析行業(yè)的領(lǐng)導(dǎo)者，再一次展現(xiàn)了公司集成樣品前處理SPE產(chǎn)品、色譜產(chǎn)品、質(zhì)譜產(chǎn)品于一體的技術(shù)優(yōu)勢，在第一時間推出了包含前處理在內(nèi)的解決方案。
 

    使用沃特世混合型強陽離子交換OASIS^® MCX SPE固相萃取柱結(jié)合ACQUITY UPLC^®/Xevo^® TQ超高效液相色譜串聯(lián)四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀，可以在5分鐘內(nèi)輕松、快速、準確的檢測到極低含量的“瘦肉精”類物質(zhì)。例如在豬肉基質(zhì)中的克倫特羅（Clenbuterol）可以達到低于0.005ppb（5ppt）的檢測限。并且在0.05ppb基質(zhì)濃度下6針重復(fù)進樣RSD為2.65%。對于豬尿液當(dāng)中的克倫特羅（Clenbuterol）甚至可以達到0.001ppb（1ppt）的檢測限。沃特世UPLC/Xevo TQ 免費附帶的Quanpedia方法庫已經(jīng)自帶了超過28種常見β-受體激動劑的MRM條件，您無需再對這些化合物進行質(zhì)譜參數(shù)的調(diào)諧即可輕松獲取分析方法。
 

圖一：沃特世UPLC/Xevo TQ超高效液相色譜串聯(lián)四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀


 

圖二：基質(zhì)當(dāng)中0.05ppb克倫特羅（Clenbuterol）的檢出信噪比S/N(PtP)>60


 

圖三：克侖特羅系由尿樣獲得，按照(A)20pg/mL，(B)10pg/mL和(C)1pg/mL加樣。

    豬肉及豬肝臟中的β-受體激動劑（克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布它林、塞曼特羅、塞布特羅、溴代克侖特羅、溴布特羅、苯氧丙酚胺）的前處理方法如下：

    1. 取2 g 粉碎樣品，加入8 mL 0.2 M 的pH為5.2的乙酸鈉緩沖液，充分混勻后，加入50 μL β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶混勻，于37 ˚C水浴水解過夜。

    2. 將水解液振蕩15 min，在5000 rpm條件下離心分離10 min后，取4 mL上清液，添加100 μL10ng/mL的內(nèi)標溶液(克倫特羅-D9,沙丁胺醇-D3)混勻,加入5 L0.1M高氯酸混合均勻 并 調(diào)節(jié)溶液pH 值到1 ± 0.3。以5000 rpm條件下離心分離10 min后，移取上清液并用 10 M 的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到11。

    3. 加入10 mL 飽和氯化鈉溶液和10 mL 異丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液，離心分離后取有 機相，在40˚C 水浴下用氮氣將其吹干。

    4. 提取殘渣中加入5 mL 0.2 M乙酸鈉緩沖液(pH 5.2)，超聲混勻溶解殘渣。

    5．進行下一步固相萃取凈化。（參考下圖）

    解決方案涉及產(chǎn)品信息：
 

    SPE固相萃取柱：Oasis MCX 3cc/60mg （產(chǎn)品部件號186000254）

    UPLC色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3，1.8um 2.1mm*50mm（產(chǎn)品部件號186003538）

    HPLC色譜柱：Atlantis T3，5um 2.1mm*150mm（產(chǎn)品部件號186003736）